Shutterstock
Επίσης ονομάζεται ηλεκτροφόρηση πρωτεΐνης ή πρωτόγραμμα, αυτή η δοκιμή πραγματοποιείται υιοθετώντας μια πολύ συγκεκριμένη μέθοδο: εφαρμόζεται ένα ηλεκτρικό πεδίο στο δείγμα, χάρη στο οποίο οι πρωτεΐνες "ομαδοποιούνται" ανά τύπο. Κάθε μία από τις πρωτεΐνες επιτρέπει την ανάλυση της ηλεκτροφόρησης. , έχει τη δική του μοριακή μάζα και ηλεκτρικό φορτίο, που τους επιτρέπει να ανταποκρίνονται στην τάση που παρέχει το συνεχές ρεύμα με χαρακτηριστικό τρόπο. Υπό κανονικές συνθήκες, για παράδειγμα, η πρώτη αναμενόμενη κορυφή - υψηλότερη και στενότερη - στο ηλεκτροφορητικό ίχνος αντιστοιχεί σε λευκωματίνη.
Με πιο πρακτικούς όρους, η "ηλεκτροφόρηση είναι μια" ανάλυση που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό:
- Η παρουσία ανώμαλων πρωτεϊνών.
- Η απουσία φυσιολογικών πρωτεϊνών.
- Αν μια ομάδα πρωτεϊνών υπάρχει σε μικρότερες ή μεγαλύτερες ποσότητες από το κανονικό.
Η ηλεκτροφόρηση μπορεί να ζητηθεί από τον γιατρό ως μέρος των δοκιμών ελέγχου (ανάλυση ρουτίνας) ή της διαγνωστικής διαδικασίας, δηλαδή σε περίπτωση που άλλες εργαστηριακές εξετάσεις έχουν δείξει αλλοιώσεις και είναι απαραίτητο να διερευνηθεί ή να επιβεβαιωθεί μια κλινική υπόνοια.
, νωτιαίος μυελός, κρανιακά νεύρα και ρίζες νωτιαίου μυελού).Ηλεκτροφόρηση: τι μετριέται
Οι πρωτεΐνες του πλάσματος είναι πολύ σημαντικοί δείκτες: τυχόν αλλαγές στις συγκεντρώσεις τους μπορεί να σηματοδοτήσουν την παρουσία πολυάριθμων ασθενειών.
Με την ηλεκτροφόρηση είναι δυνατόν να διαχωριστούν οι ακόλουθες πρωτεΐνες στο δείγμα:
- Α "λευκωματίνη.
- Οι άλφα 1 σφαιρίνες.
- Οι άλφα 2 σφαιρίνες.
- Οι βήτα σφαιρίνες.
- Οι γάμμα σφαιρίνες.
Προς το παρόν, πολλά εργαστήρια πραγματοποιούν διαχωρισμό σε 6 ζώνες, δηλαδή με το διαχωρισμό των β -σφαιρινών σε δύο κλάσματα:
- Βήτα 1 σφαιρίνες.
- Βήτα 2 σφαιρίνες.
Ξέρατε ότι…
Στο εργαστήριο, η ηλεκτροφόρηση είναι μία από τις πιο ευρέως χρησιμοποιούμενες τεχνικές για την ανάλυση της ποιοτικής και ποσοτικής σύνθεσης των πρωτεϊνών. Αυτή η μέθοδος διαχωρισμού βασίζεται στη διαφορετική ταχύτητα μετανάστευσης των ηλεκτρικά φορτισμένων σωματιδίων, μέσω διαλύματος και μέσου στήριξης, κάτω από το " επιρροή ενός ηλεκτρικού πεδίου.
Η λευκωματίνη είναι η πιο άφθονη πρωτεΐνη στον ορό γάλακτος και μία από τις πιο σημαντικές στο σώμα. Αυτό συντίθεται από το ήπαρ και περιέχεται κυρίως σε διάμεσα υγρά και πλάσμα, όπου και μόνο αντιπροσωπεύει περίπου τις μισές από τις πρωτεΐνες που κυκλοφορούν. Η λευκωματίνη εκτελεί διάφορες λειτουργίες, συμπεριλαμβανομένης της σωστής διαχείρισης της οσμωτικής πίεσης και της μεταφοράς ουσιών, όπως η χολερυθρίνη.
Οι άλφα σφαιρίνες 1 και 2 εκτελούν κυρίως μια λειτουργία μεταφοράς λιπιδίων, λιπών στο αίμα και ορμονών. Οι βήτα σφαιρίνες μεταφέρουν επίσης ουσίες που υπάρχουν στο αίμα. Μεταξύ των πιο γνωστών πρωτεϊνών αυτής της ομάδας είναι η τρανσφερίνη (υπεύθυνη για τη μεταφορά σιδήρου) και η β-2 μικροσφαιρίνη. Οι γάμμα σφαιρίνες, από την άλλη πλευρά, έχουν κυρίως λειτουργία αντισωμάτων.
Ορισμένες πρωτεΐνες πλάσματος παράγονται από το ήπαρ (όπως η λευκωματίνη), ενώ άλλες απελευθερώνονται στο αίμα από κύτταρα που ανήκουν στο ανοσοποιητικό σύστημα (γάμμα σφαιρίνες).
Για να μάθετε περισσότερα: Πρωτεΐνες πλάσματος - λειτουργίες και χαρακτηριστικάΗλεκτροφόρηση: βασική αρχή
Εισαγωγή: γενικά, η ηλεκτροφόρηση είναι μια μέθοδος διαχωρισμού που βασίζεται στη διαφορετική ταχύτητα μετανάστευσης των ηλεκτρικά φορτισμένων σωματιδίων, μέσω ενός διαλύματος και ενός πορώδους και αδρανούς μέσου στήριξης (όπως χαρτί, πηκτή αγαρόζης ή φύλλο οξικής κυτταρίνης), υπό την ώθηση ενός ηλεκτρικού πεδίο. Πολλά μόρια βιολογικού ενδιαφέροντος (αμινοξέα, πεπτίδια, πρωτεΐνες, DNA και RNA) διαθέτουν ιονίζουσες ομάδες στη δομή τους, επομένως, σε κατάλληλη τιμή ρΗ, αυτά υπάρχουν σε διάλυμα ως ηλεκτρικά φορτισμένα είδη. Υπό την επίδραση ενός ηλεκτρικού πεδίου αυτά τα φορτισμένα μόρια μεταναστεύουν προς την κάθοδο ή την άνοδο, ανάλογα με το αν έχουν θετικό (κατιόν) ή αρνητικό (ανιόν) φορτίο.
Η ηλεκτροφόρηση είναι μια μέθοδος που επιτρέπει τον διαχωρισμό των μακρομορίων και, ειδικότερα, των πρωτεϊνών με βάση:
- Μοριακή μάζα;
- Ηλεκτρικό φορτίο.
Όταν τοποθετούνται σε ένα βασικό περιβάλλον, οι πρωτεΐνες συμπεριφέρονται σαν οξέα: η ομάδα COOH των διαφόρων αμινοξέων που αποτελούν τη δομή του μακρομορίου, διαχωρίζεται σε COO– (αρνητικό σωματίδιο) και H + (θετικό ιόν). Οι πρωτεΐνες επομένως φορτίζονται συνολικά σε αρνητική κατεύθυνση και η ηλεκτροφορητική τους κινητικότητα πηγαίνει από τον αρνητικό πόλο (κάθοδο) στον θετικό, δηλαδή προς την άνοδο (αφού τα αρνητικά φορτία υπερβαίνουν τα θετικά).
Επιστρέφοντας στην εξέταση, το δείγμα του ασθενούς - που περιέχει ένα μείγμα πρωτεϊνών (π.χ. πρωτεΐνες ορού) - τοποθετείται σε μια ηλεκτροφορητική λωρίδα, δηλαδή το υποστήριγμα μετανάστευσης.
Ο διαχωρισμός σε πέντε ζώνες επιτυγχάνεται με την εφαρμογή ενός ηλεκτρικού πεδίου, που παράγεται από ένα συνεχές ρεύμα, το οποίο επιτρέπει στα διαφορετικά κλάσματα πρωτεΐνης να μεταναστεύουν ανάλογα με τη μάζα τους και το ηλεκτρικό φορτίο τους.
Shutterstock
Το αποτέλεσμα - που ονομάζεται ELECTROPHORETIC TRACE - αποτελείται από διάφορες κορυφές και καμπύλες, που αντιστοιχούν στα πρωτεϊνικά κλάσματα, διαιρούμενα κατά τύπο και ποσότητα, που υπάρχουν στο υπό εξέταση υγρό:
- Κανονικά, η πρώτη κορυφή, υψηλότερη και στενότερη, είναι αυτή του ALBUMINA.
- Στη συνέχεια, παρατηρούνται οι κορυφές των GLOBULINS, πολύ χαμηλότερες από τη λευκωματίνη.
Η αύξηση ή μείωση του πλάτους και της έντασης των κορυφών που σχηματίζονται στο ίχνος υποδηλώνουν μεγαλύτερη ή μικρότερη παρουσία των πρωτεϊνών κάθε κατηγορίας.
Ξέρατε ότι…
Στο παρελθόν, η τρανσθυρετίνη ορίστηκε ως προαλβουμίνη λόγω της μεγαλύτερης ηλεκτροφορητικής της κινητικότητας σε σύγκριση με τη λευκωματίνη, η οποία της επιτρέπει να μεταναστεύσει σε μια πιο ανοδική θέση.
Για περισσότερες πληροφορίες: Prealbumin - Τι είναι ?Ηλεκτροφόρηση: πότε συνταγογραφείται η εξέταση;
ΕΙΣΑΓΩΓΗ: η μέτρηση των συνολικών πρωτεϊνών στο αίμα - πρωτεϊνιομυμία - και λευκωματίνης - λευκωματιναιμία - συνήθως περιλαμβάνεται στους πίνακες ελέγχου, επομένως χρησιμοποιείται συχνά στην αξιολόγηση της κατάστασης της υγείας ενός ατόμου. Σε αναλύσεις ρουτίνας, η αλλαγή Αυτές οι παράμετροι μπορούν να θεωρηθούν ΚΟΥΜΠΑΝΑ ΣΥΝΑΓΕΡΜΟΥ και μπορούν να προκαλέσουν εμβάθυνση στην κλινική εικόνα, ειδικά εάν ο ασθενής εμφανίσει συγκεκριμένη συμπτωματολογία.
Η ηλεκτροφόρηση PROTEIN ορού μπορεί να συνταγογραφηθεί:
- Σε περίπτωση που άλλες εργαστηριακές εξετάσεις παρέχουν μη φυσιολογικό αποτέλεσμα, από την απουσία ή μικρότερη και μεγαλύτερη ποσότητα πρωτεϊνών πλάσματος από το κανονικό.
- Όταν η παρουσία:
- Φλεγμονή σε εξέλιξη.
- Μόλυνση;
- Αυτοάνοσο νόσημα;
- Νεφροπάθεια;
- Ηπατική νόσος;
- Ασθένειες που χαρακτηρίζονται από την παραγωγή ενός μονοκλωνικού συστατικού, δηλαδή αντισωμάτων με την ίδια ακριβώς χημική δομή, όπως:
- Πολλαπλό μυέλωμα και οι παραλλαγές του.
- Μακροσφαιριναιμία του Waldenström.
- Αμυλοείδωση.
Όταν υπάρχει υψηλή συγκέντρωση πρωτεΐνης στα ούρα, ωστόσο, ο γιατρός μπορεί να ζητήσει την εκτέλεση της ηλεκτροφόρησης των ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ ΟΥΡΩΝ. Η εξέταση επιτρέπει τον προσδιορισμό της πηγής της αλλαγής, επιβεβαιώνοντας ή υποστηρίζοντας τη διάγνωση.
Μάθετε περισσότερα: Πρωτεϊνουρία (Πρωτεΐνη στα ούρα) - Αιτίες και νόημαΗ ηλεκτροφόρηση LIQUOR PROTEIN μπορεί να συνταγογραφηθεί όταν υπάρχει υποψία διάγνωσης της σκλήρυνσης κατά πλάκας. Σε αυτή την περίπτωση, το ηλεκτροφορητικό μοτίβο που προσδιορίζεται είναι χαρακτηριστικό, καθώς αναδεικνύει την παρουσία των λεγόμενων ολιγοκλωνικών ζωνών, που δεν υπάρχουν φυσιολογικά στην ηλεκτροφόρηση των πρωτεϊνών. ορρός.
Μόλις διαγνωστεί η ασθένεια, η ηλεκτροφόρηση μπορεί να γίνει σε τακτά χρονικά διαστήματα για:
- Παρακολουθήστε την παθολογία με την πάροδο του χρόνου και, στη συνέχεια, ακολουθήστε την πορεία της (παρακολούθηση).
- Ελέγξτε την αποτελεσματικότητα του θεραπευτικού πρωτοκόλλου.
Σφαιρίνες άλφα 1
Οι σφαιρίνες άλφα-1 αποτελούν το 2,0-3,5% των συνολικών πρωτεϊνών πλάσματος.
- Τιμή αναφοράς Άλφα 1 σφαιρίνες: 0,2-0,4 g / dl
Άλφα 2 σφαιρίνες
Οι σφαιρίνες άλφα-2 αντιπροσωπεύουν το 6-11% των συνολικών πρωτεϊνών πλάσματος.
- Τιμή αναφοράς Alpha 2 σφαιρίνες: 0,4-0,8 g / dl
Βήτα σφαιρίνες
Οι βήτα σφαιρίνες αποτελούν το 6-12% των συνολικών πρωτεϊνών πλάσματος.
- Τιμή αναφοράς βήτα σφαιρίνες: 0,6-1 g / dl
Γάμμα σφαιρίνες
Οι γάμμα σφαιρίνες αποτελούν το 9-20% των συνολικών πρωτεϊνών πλάσματος.
- Τιμή αναφοράς Γ σφαιρίνες: 0,9-1,4 g / dl
Λάβετε υπόψη: το εύρος αναφοράς του τεστ μπορεί να διαφέρει ελαφρώς ανάλογα με την ηλικία, το φύλο και τα όργανα που χρησιμοποιούνται στο εργαστήριο ανάλυσης. Για το λόγο αυτό, είναι προτιμότερο να συμβουλευτείτε τα εύρη που αναφέρονται απευθείας στην έκθεση. Πρέπει επίσης να θυμόμαστε ότι τα αποτελέσματα των αναλύσεων πρέπει να αξιολογούνται στο σύνολό τους από τον γενικό ιατρό που γνωρίζει το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς.
, συμπεριλαμβανομένου:- Επίμονος εμετός και διάρροια
- Εκτεταμένα εγκαύματα.
- Υπερβολικός ιδρώτας
- Νόσος του Addison.
- Διαβητικό κώμα.
Στο ηλεκτροφορητικό ίχνος, μια υψηλότερη από την κανονική συγκέντρωση λευκωματίνης θα μπορούσε να είναι ενδεικτική:
- Σαρκοείδωση (συστηματική φλεγμονώδης νόσος).
- Νόσος Buerger ή θρομβοαγγειίτιδα obliterans (ασθένεια που επηρεάζει τα αιμοφόρα αγγεία και τις αρτηρίες).
ALPHA 1 GLOBULINS
Οι σφαιρίνες άλφα 1 αυξάνονται στις ακόλουθες περιπτώσεις:
- Φλεγμονώδης διαδικασία ή συνεχής μόλυνση.
- Εμφραγμα;
- Λήψη του αντισυλληπτικού χαπιού.
- Εγκυμοσύνη.
ALPHA 2 GLOBULINS
Οι υψηλές τιμές των σφαιρινών άλφα 2 μπορούν να σηματοδοτήσουν την παρουσία:
- Νεφρική Νόσος;
- Φλεγμονή ή συνεχής μόλυνση.
- Εμφραγμα;
- Διαβήτης;
- Σύνδρομο Down;
- Μερικοί κακοήθεις όγκοι.
BETA GLOBULINS
Η αύξηση των βήτα σφαιρινών στο ηλεκτροφορητικό μοτίβο είναι ενδεικτική για:
- Υψηλή χοληστερόλη στο αίμα (υπερχοληστερολαιμία).
- Σιδηροπενική αναιμία;
- Μερικές περιπτώσεις πολλαπλού μυελώματος.
- Εγκυμοσύνη.
GLOBULIN RANGE
Στην ηλεκτροφόρηση, η αύξηση των πολυκλωνικών γ -σφαιρινών μπορεί να σχετίζεται με:
- Χρόνιες φλεγμονώδεις ασθένειες.
- Ορισμένες ασθένειες του ανοσοποιητικού συστήματος.
- Ρευματοειδής αρθρίτιδα;
- Συστηματικός ερυθηματώδης λύκος;
- Χρόνια ηπατική νόσο (όπως ηπατίτιδα και κίρρωση).
- Οξείες και χρόνιες λοιμώξεις.
Ωστόσο, υψηλές τιμές μονοκλωνικών γαμασφαιρινών μπορεί να υποδηλώνουν την παρουσία:
- Μερικοί όγκοι?
- Πολλαπλό μυέλωμα.
- Λέμφωμα;
- Μακροσφαιριναιμία Waldenström.
Για να προσδιοριστεί ποια γάμμα σφαιρίνη υπάρχει στη μονοκλωνική ζώνη σε ένα ηλεκτροφορητικό ίχνος, είναι δυνατό να προχωρήσουμε σε μια «ανοσοδιόρθωση.
Ηλεκτροφόρηση ούρων
Μια σημαντική αύξηση της πρωτεΐνης ούρων στην ηλεκτροφόρηση μπορεί να υποδηλώνει δυσλειτουργία των σπειραμάτων και των νεφρικών σωληναρίων.
Ηλεκτροφόρηση ποτών
Εάν η ηλεκτροφόρηση καταλήξει σε πρωτεΐνες που δεν υπάρχουν φυσιολογικά στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό ή αυτές είναι αυξημένες, μπορεί να υπάρχει «φλεγμονή», λοίμωξη ή άλλη ασθένεια που επηρεάζει το νευρικό σύστημα.
Η εύρεση ολιγοκλωνικών ζωνών στο ηλεκτροφορητικό μοτίβο είναι ενδεικτική της σκλήρυνσης κατά πλάκας.
(ειδικότερα: ανεπάρκειες πρωτεϊνών λόγω μειωμένης διαιτητικής πρόσληψης) ·Οι κορυφές της λευκωματίνης μειώνονται επίσης μετά από παθολογίες που επηρεάζουν το ήπαρ (η ικανότητα σύνθεσης είναι μικρότερη) και το νεφρό (η αποβολή αυξάνεται).
Η συγκέντρωση λευκωματίνης που βρέθηκε με ηλεκτροφόρηση στον ορό μπορεί να μειωθεί, ιδίως, όταν διαπιστωθούν τα ακόλουθα:
- Κίρρωση του ήπατος (αυτή είναι η πιο κοινή αιτία).
- Οξεία και χρόνια ηπατίτιδα.
- Γενετικές ανωμαλίες (σύνθεση ελαττωματικών λευκωματινών).
- Νεφρική νόσος (ιδιαίτερα νεφρωσικό σύνδρομο και σπειραματονεφρίτιδα).
Η διαπίστωση «χαμηλής λευκωματίνης με ηλεκτροφόρηση» παρατηρείται επίσης στην εγκυμοσύνη για:
- Ορμονικές τροποποιήσεις που μεταβάλλουν την αγγειακή διαπερατότητα και τη λειτουργικότητα πολυάριθμων οργάνων της εγκύου.
- Αυξημένη χρήση πρωτεϊνών από το έμβρυο.
ALPHA 1 GLOBULINS
Οι σφαιρίνες άλφα 1 μειώνονται με ηλεκτροφόρηση παρουσία:
- Σοβαρή ηπατική νόσο.
- Συγγενές εμφύσημα;
- Νεφρική Νόσος.
ALPHA 2 GLOBULINS
Οι χαμηλές τιμές των σφαιρινών άλφα 2 μπορεί να είναι ενδεικτικές για:
- Υποσιτισμός;
- Σοβαρή ηπατική νόσο.
- Αιμόλυση.
BETA GLOBULINS
Μειωμένη συγκέντρωση βήτα σφαιρινών στο ίχνος ηλεκτροφόρησης μπορεί να σηματοδοτήσει:
- Υποσιτισμός;
- Κίρρωση του ήπατος.
GLOBULIN RANGE
Οι μειωμένες τιμές των γ σφαιρινών μπορεί να υποδεικνύουν την παρουσία διαφόρων ασθενειών του ανοσοποιητικού συστήματος.
Ηλεκτροφόρηση ούρων
Κανονικά, μια μικρή συγκέντρωση πρωτεΐνης βρίσκεται στα ούρα με ηλεκτροφόρηση. Επομένως, αυτό το αποτέλεσμα δεν υποδηλώνει την παρουσία ορισμένων ασθενειών.
Ηλεκτροφόρηση ποτών
Υπό κανονικές συνθήκες, η συγκέντρωση των συνολικών πρωτεϊνών στο ΕΝΥ είναι πολύ χαμηλή. Η εύρεση μειωμένων τιμών στην ηλεκτροφόρηση δεν συσχετίζεται επομένως με μια ιδιαίτερη παθολογική σημασία.
): για να αποκτήσετε το ηλεκτροφορητικό ίχνος στον ορό είναι απαραίτητο να υποβληθείτε σε ένα απλό δείγμα αίματος από τη φλέβα ενός βραχίονα. Στη συνέχεια, ο ορός λαμβάνεται διαχωρίζοντας το κλάσμα που περιέχει τα κύτταρα από το υγρό.Τι μπορεί να αλλάξει το αποτέλεσμα της εξέτασης;
Ορισμένα φάρμακα μπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσμα της ηλεκτροφόρησης, επομένως είναι σκόπιμο να αναφέρετε τυχόν συνεχιζόμενες θεραπείες στον γιατρό σας. Τα φάρμακα που μπορούν να αλλάξουν τα κλινικά ευρήματα περιλαμβάνουν, για παράδειγμα, από του στόματος αντισυλληπτικά, αναβολικά στεροειδή, ανδρογόνα, αυξητικές ορμόνες, ινσουλίνη και αντιβιοτικά.
Άλλοι παράγοντες που μπορούν να επηρεάσουν την εξέταση περιλαμβάνουν:
- Υπερλιπιδαιμία (παρουσία πολλών λιπαρών στο αίμα).
- Χορήγηση μεγάλων ποσοτήτων υγρών ενδοφλεβίως.
- Χορτοφαγική διατροφή?
- Αιμολυμένα δείγματα (εάν πραγματοποιηθεί ηλεκτροφόρηση στον ορό).